Diseño y desarrollo de nuevas formulaciones para la vehiculización de genes terapéuticos con aplicación al cáncer de hígado y colon
Gemma Navarro Díez, Mª Concepción Tros de Ilarduya Apaolaza
Resumen
El cáncer es una de las principales causas de muerte en todo el mundo. La liberación de genes terapéuticos vehiculizados en nuevas formas farmacéuticas se presenta como una prometedora alternativa en el tratamiento de esta enfermedad. Los dendrímeros PAMAM son polímeros catiónicos cuya aplicación como vehículos en terapia génica está generando un interés creciente en la comunidad científica. La mezcla de los dendrímeros con DNA lleva a la formación de complejos por interacción electrostática que reducen el tamaño y la carga del DNA, lo protegen de la degradación por las nucleasas del suero y aumentan su entrada en la célula por endocitosis. Sin embargo, la influencia de los aspectos físico-químicos en la eficacia de estos vectores, así como el balance óptimo entre su eficacia y toxicidad no han sido totalmente elucidados. En este trabajo se han empleado dendrímeros de distintos pesos moleculares (14.000 Da y 28.000 Da) y se han asociado a DNA plasmídico en cantidades crecientes. Las formulaciones preparadas con el dendrímero de 14.000 Da presentaron tamaños de partícula de entre 150 y 170 nm, mientras que a las mismas relaciones de carga, los complejos preparados con el polímero de mayor peso molecular presentaron valores menores, de alrededor de 100 nm. El potencial de superficie fue positivo en todos los casos excepto cuando se utilizó la misma cantidad de polímero y de DNA (punto de electroneutralidad). Además, en este estudio se ha demostrado la capacidad de estas formulaciones para proteger al DNA frente a la degradación por DNAasas independientemente del peso molecular y cantidades utilizadas. Los resultados in vitro en células HepG2 (hepatocarcinoma humano) y CT26 (cáncer de colon murino) sugieren que a mayor peso molecular y a mayor cantidad de dendrímero se obtienen mayores niveles de expresión génica. Por último, señalar que los estudios de toxicidad determinaron una viabilidad celular superior al 80% en todos los casos. Palabras clave: terapia génica, dendrímeros, polímeros, galénica, PAMAM (poliamidoamina).
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